分光光度計(jì)是精密儀器,正確安裝、使用及保養(yǎng)對(duì)保持儀器良好的性能和保證測(cè)試的準(zhǔn)確度具有重要作用。為了保證測(cè)試結(jié)果的準(zhǔn)確性及可靠性,新制造、使用中和修理后的分光光度計(jì)都應(yīng)定期進(jìn)行檢定。檢定不合格的儀器還要進(jìn)行及時(shí)調(diào)整。除此之外,分光光度計(jì)的操作步驟都有啥?為了解決使用者的疑惑,更好的保護(hù)分光光度計(jì)與實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,本次特別介紹分光光度計(jì),供參考!
分光光度計(jì)的檢驗(yàn)小妙招
1.波長準(zhǔn)確度的檢驗(yàn):分光光度計(jì)在使用過程中,由于機(jī)械振動(dòng)、溫度變化、燈絲變形、燈座松動(dòng)或更換燈泡等原因,經(jīng)常會(huì)出現(xiàn)刻度盤上的讀數(shù)與實(shí)際通過溶液的波長不符合的現(xiàn)象,因而導(dǎo)致儀器靈明度降低,影響測(cè)定結(jié)果的精度,需要進(jìn)行檢驗(yàn)。
檢驗(yàn)波長準(zhǔn)確度簡單的方法是用干涉濾光片或鐠釹濾光片測(cè)量儀器的吸收峰值,如果測(cè)出的值與濾光片標(biāo)準(zhǔn)值之差超出規(guī)程規(guī)定,則需要進(jìn)行波長調(diào)節(jié)。
2.透射比正確度的檢驗(yàn):用透射比標(biāo)準(zhǔn)值分別為10%、20%、30%左右的光譜中性濾光片,可見光區(qū)分別在440、546、635nm波長處,以空氣為參比,分別測(cè)量各濾光片的透射比,紫外光區(qū)用重鉻酸鉀溶液分別在235、257、313、350nm波長處,以高氯酸溶液為參比,測(cè)量其透射比。
3.穩(wěn)定度的檢驗(yàn):在零點(diǎn)不受光的條件下,用零點(diǎn)調(diào)節(jié)器將儀器調(diào)至零點(diǎn),觀察3分鐘讀取透射比的變化,即為零點(diǎn)穩(wěn)定性。在儀器測(cè)量范圍兩端向中間靠10nm處,調(diào)節(jié)零點(diǎn)后,蓋上樣品室蓋(打開光門),使光電管受光,調(diào)節(jié)透射比為95%(數(shù)顯儀器調(diào)至100%)察3分鐘讀取透射比的變化,為光電流穩(wěn)定性。
4.光的檢驗(yàn):
可見分光計(jì)棱鏡式儀器在420nm處,光柵式儀器在360nm處,紫外分光計(jì)在220nm處分別用符合規(guī)定的截止濾光片,以空氣為參比,測(cè)量其透射比值,即為儀器在相應(yīng)波長下的雜散輻射率。
使用分光光度計(jì)的步驟與方法
1.預(yù)熱儀器:為使測(cè)定穩(wěn)定,將電源開關(guān)打開,使儀器預(yù)熱20min,為了防止光電管疲勞,不要連續(xù)光照。預(yù)熱儀器時(shí)和在不測(cè)定時(shí)應(yīng)將比色皿暗箱蓋打開,使光路切斷。
選定波長:根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求,轉(zhuǎn)動(dòng)波長調(diào)節(jié)器,使指針指示所需要的單色光波長。
固定靈敏度檔:根據(jù)有色溶液對(duì)光的吸收情況,為使吸光度讀數(shù)為0.2~0.7,選擇合適的靈敏度。為此,旋動(dòng)靈敏度檔,使其固定于某一檔,在實(shí)驗(yàn)過程中不再變動(dòng)。一般測(cè)量固定在“1”檔。
調(diào)節(jié)“0”點(diǎn):
輕輕旋動(dòng)調(diào)“0”電位器,使讀數(shù)表頭指針恰好位于透光度為“0”處(此時(shí),比色皿暗箱蓋是打開的,光路被切斷,光電管不受光照)。
調(diào)節(jié)T=100%:
將盛蒸餾水(或空白溶液或純?nèi)軇?的比色皿放入比色皿座架中的格內(nèi),有色溶液放在其它格內(nèi),把比色皿暗箱蓋子輕輕蓋上,轉(zhuǎn)動(dòng)光量調(diào)節(jié)器,使透光度T=100%,即,表頭指針恰好指在T=100%處。
測(cè)定:輕輕拉動(dòng)比色皿座架拉桿,使有色溶液進(jìn)入光路,此時(shí)表頭指針?biāo)緸樵撚猩芤旱奈舛華,讀數(shù)后,打開比色皿暗箱蓋。
關(guān)機(jī):實(shí)驗(yàn)完畢,切斷電源,將比色皿取出洗凈,并將比色皿座架及暗箱用軟紙擦凈。
使用分光光度計(jì)的注意事項(xiàng)都是什么?
1)為了防止光電管疲勞:
不測(cè)定時(shí)必須將比色皿暗箱蓋打開,使光路切斷,以延長光電管使用壽命。
2)比色皿的使用方法:
①拿比色皿時(shí):手指只能捏住比色皿的毛玻璃面,不要碰比色皿的透光面,以免沾污。
?、谇逑幢壬髸r(shí):一般先用水沖洗,再用蒸餾水洗凈。如,比色皿被有機(jī)物沾污,可用鹽酸-乙醇混合洗滌液(1:2)浸泡片刻,再用水沖洗。不能用堿溶液或氧化性強(qiáng)的洗滌液洗比色皿,以免損壞。也不能用毛刷清洗比色皿,以免損傷它的透光面。每次做完實(shí)驗(yàn)時(shí),應(yīng)立即洗凈比色皿。
?、郾壬笸獗诘乃貌羚R紙或細(xì)軟的吸水紙吸干:以保護(hù)透光面。
④測(cè)定有色溶液吸光度時(shí):一定要用有色溶液洗比色皿內(nèi)壁幾次,以免改變有色溶液的濃度。另外,在測(cè)定一系列溶液的吸光度時(shí),通常都按由稀到濃的順序測(cè)定,以減小測(cè)量誤差。
?、菰趯?shí)際分析工作中:通常根據(jù)溶液濃度的不同,選用液槽厚度不同的比色皿,使溶液的吸光度控制在0.2~0.7。
分光光度計(jì)的維護(hù)和保養(yǎng):分光光度計(jì)是精密儀器,正確安裝、使用和保養(yǎng)對(duì)保持儀器良好的性能和保證測(cè)試的準(zhǔn)確度有重要作用。
1.對(duì)儀器工作環(huán)境的要求:分光光度計(jì)應(yīng)安裝在穩(wěn)定的工作臺(tái)上,(周圍不應(yīng)有強(qiáng)磁場(chǎng),以防電磁干擾),室內(nèi)溫度應(yīng)保持在(10~30)℃。室內(nèi)應(yīng)干燥,相對(duì)濕度宜控制在<85%,室內(nèi)應(yīng)無腐蝕性氣體,光線不宜過強(qiáng)。
2.儀器保養(yǎng)和維護(hù)方法
(1)儀器工作電壓一般為220V,允許±10%的電壓波動(dòng)。為保持光源燈和檢測(cè)系統(tǒng)的穩(wěn)定性,在電源電壓波動(dòng)較大的實(shí)驗(yàn)室好配備穩(wěn)壓器。
(2)為了延長光源使用壽命,在不用時(shí)不用開光源燈。如果光源燈亮度明顯減弱或不穩(wěn)定,應(yīng)及時(shí)更換新燈。更換后要調(diào)節(jié)好燈絲位置,不要用手直接接觸窗口或燈泡,避免油污沾附,若不小心接觸過,要用無水乙醇擦拭。
(3)單色器是儀器的核心部分,裝在密封盒內(nèi),不能拆開,為防止色散元件受潮發(fā)霉,必須經(jīng)常更換干燥劑。
(4)必須正確使用吸收池,保護(hù)吸收池光學(xué)面。
(5)光電轉(zhuǎn)換元件不能長時(shí)間曝光,應(yīng)避免強(qiáng)光照射或受潮積塵。